三(sān)種消(xiāo)毒劑(jì)檢測方(fāng)法(fǎ)分析(xī)對比(bǐ)
　　對三種消(xiāo)毒劑檢測方法戊二(èr)醛溶液
，二氯異(yì)氰尿(niào)酸鈉溶液(yè)係滅(miè)枯草杆(gān)菌黑(hēi)色變種芽孢的(dí)效果進(jìn)行了比較。結果
， 用歐(ōu)洲標(biāo)準(zhǔn)懸(xuán)液定量殺(shā)菌(jūn)試驗． 改良(liáng)歐(ōu)洲懸(xuán)液(yè)定量殺菌(jūn)試(shì)驗和載體浸泡定量殺菌試驗(yàn)檢測含(hán)戊二(èr)醛2％ (g／m1)溶(róng)液(yè)殺(shā)滅(miè)枯(kū)草杆(gān)菌黑色變種(zhǒng)芽化達消(xiāo)毒(dú)合格(gé)標(biāo)準
， 作用(yòng)時間(jiān)分(fēn)別(bié)為2.5．3.0
，2.0 h。用(yòng)前兩方法檢(jiǎn)測(cè)含(hán)有效(xiào)氯4 500 mg／L的二氯(lǜ)異氰尿(niào)酸鈉溶液及用載體方法(fǎ)檢(jiǎn)測含(hán)有(yǒu)效氯l 000 mg／L該液(yè)殺滅(miè)枯(kū)草(cǎo)杆(gān)菌黑(hēi)色變種芽孢達消(xiāo)毒(dú)合格(gé)標(biāo)準(zhǔn)
，作用時間(jiān)分(fēn)別為30
，20．10 min。當染(rǎn)菌片的(dí)芽孢懸液中增(zēng)含小(xiǎo)牛血清50%(ml／m1)時
， 用載體方法檢測(cè)含有(yǒu)效氯(lǜ)5 000 mg／L的(dí)二氯異(yì)氰(qíng)尿酸鈉溶液(yè)殺滅(miè)該(gāi)芽孢達(dá)消毒合(hé)格(gé)標準(zhǔn)
，作用(yòng)時間近(jìn)20 min
， 與用歐(ōu)洲標準懸(xuán)液(yè)法檢測者（30 min)相(xiāng)近(jìn) 表明三種(zhǒng)方(fāng)法檢(jiǎn)測受有(yǒu)機(jī)物影(yǐng)響(xiǎng)較小的(dí)戊二醛殺菌效果相差較小
，檢測(cè)受(shòu)有機(jī)物(wù)影響較大(dà)的(dí)二氯異氰尿酸鈉殺(shā)菌(jūn)效果(guǒ)相差較大(dà)。後(hòu)者(zhě)可能(néng)與方法中(zhōng)含(hán)有機(jī)物多少有關(guān)。
　　消毒(dú)劑檢測方法
　　1，消毒(dú)劑(jì)檢測菌(jūn)懸(xuán)液與(yǔ)菌(jūn)片的製備(bèi)
　　在歐洲標準(zhǔn)懸液(yè)法(fǎ)和改(gǎi)良歐(ōu)洲懸(xuán)液(yè)法中
， 用(yòng)含胰蛋白腖(dòng)0
，1％ (g／m1) 和氯化(huà)鈉(nà)0
，85％ (g／m1) 的去離子(zǐ)水溶液(yè)(pH6 8～7 0)
， 將(jiāng)枯(kū)草(cǎo)杆(gān)菌(jūn)黑(hēi)色變種(ATCC9372）芽(yá)孢稀釋至規定含菌量(liáng)的懸液。在(zài)載體(tǐ)法中
， 用(yòng)含蛋白(bái)腖0．1％ (g／m1)的(dí)磷酸(suān)鹽(yán)緩(huǎn)衝液(PBS
， pH 7．2～7
，4)製成的(dí)枯(kū)草杆菌黑色(sè)變種(zhǒng)芽孢懸液滴染(rǎn)1
，0 cm×1
，0 cm 布片
， 製成菌片。
　　2，消(xiāo)毒(dú)劑檢測(cè)中(zhōng)和劑選擇(zé)試驗
　　因(yīn)懸(xuán)液(yè)法中和(hé)劑(jì)選擇(zé)試(shì)驗(yàn)結果可(kě)適用於載體試驗(yàn)中
， 故試驗(yàn)用(yòng)歐(ōu)洲標(biāo)準懸液法(fǎ)進行。試驗設6組
， 第(dì)l組到第5組
， 皆將0．5 ml含(hán)牛(niú)血(xiě)清白蛋白(bái)(SIGMA公司產) 3％ (g／m1) 的去(qù)離子水(shuǐ)溶(róng)液(過(guò)濾(lǜ)除(chú)菌後使用(yòng)) 加入(rù)無(wú)菌(jūn)試管(guǎn)中(zhōng)
， 再(zài)加0
，5 ml枯草(cǎo)杆菌黑(hēi)色變種芽孢(bāo)懸(xuán)液
， 混(hùn)匀。然後(hòu)
， 第l，2組均(jūn)加(jiā)入4．0 ml消毒劑溶(róng)液(用(yòng)標(biāo)準(zhǔn)硬(yìng)水(shuǐ)配(pèi)製)
， 作用(yòng)至(zhì)預定時(shí)間(jiān)
， 第(dì)l組吸取0
，5 ml加到含(hán)有4．5 ml PBS的試管中
， 第2組吸取0
，5 ml加到含有(yǒu)4 5 ml中和劑溶液的試管中； 第3組(zǔ)加入(rù)4．0 ml中和劑溶液
， 作用(yòng) 預定(dìng)時間(jiān)
， 吸取0，5 ml加到(dào)含有4
，5 ml中和劑溶液的試(shì)管中； 第(dì)4組(zǔ)加入4．0 ml中(zhōng)和產物(1份消毒(dú)劑(jì)溶(róng)液加(jiā)4份中(zhōng)和劑(jì)溶液(yè)
， 中(zhōng)和(hé)作(zuò)用l0 min) 溶液
，作(zuò)用(yòng)至預(yù)定(dìng)時間(jiān)
， 吸(xī)取0．5 ml加到含(hán)有4．5ml中(zhōng)和產(chǎn)物(wù)溶液的(dí)試管中： 第5組(zǔ)加入(rù)4．0ml PBS
， 作用至預(yù)定(dìng)時間
， 吸取0．5 ml加(jiā)到含有4．5 ml PBS的試管中(zhōng)。第(dì)6組(zǔ)為(wéi)中(zhōng)和(hé)劑(jì)溶液，中和(hé)產(chǎn)物溶液和胰蛋白(bái)腖大豆(dòu)蛋白(bái)腖(dòng)培(péi)養基(TSA)陰性對照。試驗結果
，以第l組(zǔ)不長菌或長菌量(liáng)遠低於(yú)第2組(zǔ)
， 第(dì)2組(zǔ)長(cháng)菌量不低於l00 cfu／ml
， 第3，4，5組長菌量(liáng)達5．0×l0 ～5．0×l0。cfu／ml且組(zǔ)間菌數相差(chà)不(bù)超過l0％ 
， 第(dì)6組不長(cháng)菌(jūn)
， 為所(suǒ)選中和劑合適。
　　3，消毒劑(jì)檢(jiǎn)測定量殺菌試驗
　　歐洲(zhōu)標(biāo)準(zhǔn)懸液定(dìng)量殺菌試驗 向試管(guǎn)內(nèi)加入0．5 ml含牛(niú)血清白(bái)蛋白(bái)3％(g／m1) 的去(qù)離(lí)子水溶液和0．5 ml枯草杆菌黑色變種芽孢懸(xuán)液
， 混匀
， 再(zài)加(jiā)入4．0 ml消毒(dú)劑溶液(陽性(xìng)對照組(zǔ)為(wéi)無菌(jūn)蒸餾水)
，混(hùn)匀(yún)並立(lì)即(jí)記(jì)時。作用(yòng)至(zhì)規定時(shí)間(jiān)
， 取0．5ml混懸(xuán)液
， 加於(yú)4．5 ml中(zhōng)和(hé)劑溶液(yè)中(zhōng)
， 混(hùn)匀。中和(hé)作(zuò)用l0 min
， 取0．5 ml該液或其稀(xī)釋液(yè)接(jiē)種(zhǒng)無菌(jūn)平皿(mǐn)
， 一式兩份(fèn)。傾注(zhù)l8～ 20 ml TSA 培(péi)養基(jī)
， 混(hùn)匀(yún)。置(37±1)℃培(péi)養72 h
， 計(jì)數(shù)菌落數
， 計算(suàn)殺(shā)滅率(shuài)。