香(xiāng)波中糖(táng)皮(pí)質(zhì)激素(sù)LC-MS/MS檢測方法研(yán)究：潑(pō)ni鬆和地sai米(mǐ)鬆的多(duō)反應(yīng)監(jiān)測應用  

一，引言  

糖(táng)皮(pí)質激(jī)素因具有(yǒu)抗炎(yán)，抗過敏功(gōng)效，被非(fēi)法(fǎ)添加於香波(bō)等(děng)化(huà)妝(zhuāng)品中，長(cháng)期(qī)使用可導致(zhì)皮(pí)膚wei縮(suō)，激素(sù)依賴性皮炎等嚴重副(fù)作(zuò)用(yòng)1。中(zhōng)國《化(huà)妝品安全(quán)技術規(guī)範》（2022年版）明(míng)確將其列為禁(jīn)用組分，要求檢出(chū)限≤0.01mg/kg2。本(běn)研究(jiū)基於(yú)LC-MS/MS多(duō)反(fǎn)應(yīng)監測（MRM）技(jì)術，建立香(xiāng)波中(zhōng)潑ni鬆(sōng)和(hé)地sai米鬆的高靈敏度檢測方法，結合(hé)基質(zhì)效應消除(chú)策略(lüè)，滿(mǎn)足法規監管需求。  

二，實驗(yàn)部分(fēn)  

1.方法(fǎ)原理(lǐ)  

在(zài)電(diàn)噴(pēn)霧(wù)正離(lí)子(zǐ)模(mó)式（ESI+）下(xià)，糖(táng)皮質(zhì)激(jī)素形(xíng)成[M+H]+母(mǔ)離子，經碰撞誘(yòu)導(dǎo)裂解（CID）產生特征碎片離子。通(tōng)過監測(cè)特定(dìng)離子對實(shí)現定性(xìng)和(hé)定(dìng)量(liáng)：  

潑ni鬆(sōng)：母(mǔ)離(lí)子m/z359.2，定(dìng)量離子對(duì)359.2→147.1（碰撞能(néng)量(liáng)25eV），定(dìng)性離子(zǐ)對359.2→341.1（碰(pèng)撞能量(liáng)20eV）；  

地sai米鬆(sōng)：母離(lí)子m/z393.2，定(dìng)量離子(zǐ)對(duì)393.2→153.1（碰撞能量30eV），定(dìng)性(xìng)離(lí)子(zǐ)對393.2→375.2（碰(pèng)撞能量25eV）3。  

2.儀器(qì)與(yǔ)試劑  

儀(yí)器：ABSciexTripleQuad6500+LC-MS/MS係(xì)統，配電噴霧離(lí)子源；  

試劑：乙(yǐ)腈（色譜純），甲酸（質譜純），潑ni鬆，地sai米(mǐ)鬆(sōng)標(biāo)準(zhǔn)品（純(chún)度(dù)≥98%），同(tóng)位素內(nèi)標潑(pō)ni鬆(sōng)-D8（100μg/mL）。  

3.實(shí)驗方法  

（1）樣(yàng)品(pǐn)前(qián)處理(lǐ)  

香波(bō)基質專用(yòng)流程：  

1.稱(chēng)取(qǔ)1.0g樣(yàng)品於(yú)50mL離心管，加入(rù)10mL乙(yǐ)腈(jīng)-水(shuǐ)（8:2，v/v），渦(wō)旋1分鐘；  

2.40℃超聲提(tí)取30分(fēn)鐘(zhōng)，加(jiā)入2g氯(lǜ)化(huà)鈉，渦旋(xuán)2分鐘，4000r/min離心10分鐘；  

3.取(qǔ)上清(qīng)液(yè)5mL上樣至HLB固(gù)相(xiāng)萃取柱(zhù)（60mg/3mL），依(yī)次(cì)用5mL水(shuǐ)-乙腈（9:1）淋洗(xǐ)，5mL甲醇洗(xǐ)脫；  

4.洗脫液(yè)40℃氮(dàn)吹(chuī)至(zhì)幹，1mL流動(dòng)相(xiāng)（0.1%甲(jiǎ)酸(suān)水-乙(yǐ)腈(jīng)=50:50）復(fù)溶(róng)，過0.22μm濾(lǜ)膜(mó)，待(dài)測。  

（2）色譜-質譜(pǔ)條件(jiàn)  

色譜(pǔ)柱：WatersACQUITYUPLCBEHC18（150mm×3.0mm，1.7μm）；  

流(liú)動相：A相(xiāng)0.1%甲(jiǎ)酸水(shuǐ)，B相乙(yǐ)腈(jīng)，梯度(dù)洗(xǐ)脫(tuō)（0-5min：10%-90%B，保(bǎo)持2min，7min回到(dào)初始(shǐ)比例(lì)）；  

流速：0.3mL/min，柱溫(wēn)40℃，進樣量(liáng)5μL；  

質譜(pǔ)參數(shù)：噴霧電壓(yā)3.5kV，離子傳輸(shū)管溫(wēn)度(dù)350℃，鞘氣流量(liáng)11L/min。  

三，結果與討論(lùn)  

1.方法性能  

（1）綫性(xìng)與(yǔ)檢(jiǎn)出限(xiàn)  

潑(pō)ni鬆和地sai米鬆在0.5-50ng/mL範圍內綫(xiàn)性(xìng)良(liáng)好（r>0.999），方法檢出限（LOD）0.005mg/kg，定量限(xiàn)（LOQ）0.01mg/kg，滿足(zú)國(guó)家標準(zhǔn)要(yào)求2。  

（2）基(jī)質效應(yīng)與回收率  

采用(yòng)同位素(sù)內標校正後，基(jī)質效應(yīng)因子(zǐ)（ME）為92%-108%，加標回收率（0.01，0.05，0.1mg/kg水(shuǐ)平）：  

化(huà)合物回收(shōu)率(shuài)（%）RSD（%，n=6）  

潑ni鬆89.6-98.33.2-5.7  

地塞mi鬆85.6-104.34.1-6.2  

2.實際(jì)樣品分析(xī)  

某(mǒu)品(pǐn)牌(pái)去屑(xiè)香(xiāng)波(bō)檢(jiǎn)測結果：潑(pō)ni鬆未檢(jiǎn)出(chū)，地(dì)塞(sāi)mi鬆(sōng)含量0.03mg/kg（n=3），超(chāo)出(chū)限(xiàn)值（0.01mg/kg），經MRM-IDA-EPI模式確證，增強(qiáng)子離子(zǐ)譜(pǔ)圖與標(biāo)準(zhǔn)品匹配度(dù)92%3。  

四(sì)，結論  

本方法(fǎ)通過超(chāo)聲提取-固(gù)相(xiāng)萃(cuì)取淨化聯用技術(shù)，有(yǒu)效(xiào)消除(chú)香波基質中表麵(miàn)活(huó)性劑(jì)的(dí)幹(gān)擾，LC-MS/MS多反應監測模式實(shí)現(xiàn)潑ni鬆和地(dì)sai米(mǐ)鬆(sōng)的(dí)高靈敏檢(jiǎn)測。方法檢出限0.005mg/kg，加(jiā)標回(huí)收率(shuài)85.6%-104.3%，適(shì)用於香波(bō)中糖皮(pí)質激素的日(rì)常監管(guǎn)和合規(guī)檢測。  

關鍵詞：糖皮質(zhì)激素；香波；LC-MS/MS；多(duō)反應監測；基質效應  

參考(kǎo)文獻  

[1]GB/T40145-2021，化(huà)妝(zhuāng)品(pǐn)中(zhōng)地索奈德等十一種糖(táng)皮質(zhì)激素的(dí)測定(dìng)液相色(sè)譜/串(chuàn)聯質(zhì)譜(pǔ)法.  

[2]沈丹(dān)丹(dān)等(děng).超(chāo)高(gāo)效(xiào)液相色譜(pǔ)-串聯質(zhì)譜法(fǎ)同(tóng)時(shí)測(cè)定(dìng)化妝品中(zhōng)100種糖皮(pí)質激(jī)素[J].色(sè)譜,2024,42(3):218-226.  

[3]《化妝品(pǐn)安全(quán)技術規範》（2022年(nián)版）附(fù)錄(lù)D.糖皮(pí)質(zhì)激素測定(dìng)方法(fǎ).